A vent'anni è alla sua prima conduzione televisiva Rai con "Tre due uno contatto... game". Poi presenta "Bim bum bam" su Italia 1 dal 1983 al 1990.

Lascia i programmi per ragazzi e conduce una serie di spettacoli in prima serata come "I Cervelloni" e "Beato tra le donne" (1993), "Tira e molla" (1996), alternandosi fra le reti Rai e Fininvest/Mediaset.

Nell'ultimo periodo si afferma definitivamente come conduttore di prima grandezza con programmi come "Ciao Darwin" (diversi cicli dal 1998) e "Chi ha incastrato Peter Pan?'(1999), "Italiani" ma soprattutto con "Striscia la notizia" dal 2000 al 2003 in coppia con Luca Laurenti.

Nel 2003 torna alla Rai per condurre "Domenica in" e "Affari tuoi".

Nel 2004 é ancora al timone del fortunato programma "Affari tuoi", che conclude la stagione con ottimi risultati d'ascolto.

Nel 2005 conduce la 55^ edizioni del Festival di Sanremo affiancato da Antonella Clerici.

Nell’estate 2005 passa di nuovo a Mediaset dove conduce per alcune puntate "Serie A".

Dal novembre del 2005 conduce per tre stagioni il programma settimanale "Il Senso della Vita", dove Bonolis, insieme ai suoi ospiti, affronta, a metà strada tra il talk show e l'approfondimento, le storie e i diversi aspetti della nostra esistenza.

Il 2006 vede il debutto di Bonolis come attore in veste di protagonista nel film di Alessandro D'Alatri “CommediaSexi”, con Sergio Rubini, Margherita Buy, Stefania Rocca ed Elena Santarelli.

Nel 2007 torna a condurre “Ciao Darwin 5”.

Nel 2009 conduce nuovamente il 59° Festival Di Sanremo affiancato da Luca Laurenti.

A settembre del 2009 ritorna sulle reti Mediaset con il programma “Chi ha incastrato Peter Pan”.

Attualmente è in fase di preparazione della sesta edizione di “Ciao Darwin”.